Курсовая работа на тему: Обзор литературы. История изобретения и принцип ПЦР. Преимущества ПЦР и возможные ошибки при

Введение

Полимеразная цепная реакция (Polymerase chain reaction), более известная как "ПЦР" (PCR) не сходит с заголовков статей научных журналов с тех пор, как была открыта Кэри Б. Мюллисом в 1983 году, за что он и был удостоен Нобелевской премии. Причина достаточно проста: ПЦР делает невозможное возможным.

Благодаря своим достоинствам, метод ПЦР широко применяется для диагностики вирусных и бактериальных инфекций, наследственных и онкологических заболеваний, в эпидемиологии, в генетике, для HLA-типирования, в судебной медицине, для определения отцовства и идентификации личности, в биотехнологии, в области сертификации пищевого сырья и продуктов питания (Малкова, 1994).

Метод ПЦР особенно эффективен при выявлении трудно культивируемых, некультивируемых, требующих сложной питательной среды и персистирующих форм микроорганизмов, с которыми часто приходится сталкиваться при латентных и хронических инфекциях, поскольку этот метод позволяет избежать сложностей, связанных с выращиванием таких микроорганизмов в лабораторных условиях (Мухина, 2002).

Диагностические возможности ПЦР не ограничены способностью микроорганизма расти на искусственных средах или в культуре клеток. Поэтому основное преимущество ПЦР перед культуральными методами состоит не в высокой чувствительности ПЦР-метода (поскольку их чувствительность сопоставима), а в способности идентифицировать, определять свойства и работать с большим разнообразием микроорганизмов, которые не удается по тем или иным причинам размножать в лабораторных условиях.

На сегодняшний день накоплен богатый опыт в теории и практике ПЦР. Однако наряду с успехами, связанными с внедрением ПЦР в клиникодиагностических лабораториях, нередко можно встретить недоверие к этому методу из-за ошибок, приводящих к некорректным результатам. В основном такие ошибки возникают на этапе забора материала для исследования. Так избыток слизи или гемоглобин могут вызвать ингибирование реакции, что приведет к ложноотрицательному результату.

Цель курсовой работы:

сбор и систематизация литературного материала по вопросу применения молекулярно-генетических методов для решения задач медицины и ветеринарии.

Задачи:

. Изучение истории становления современных молекулярно- генетических методов;

. Ознакомление с методическими аспектами различных вариантов ПЦР;

. Характеристика направлений использования ПЦР- диагностики.

Оглавление

- Введение

- Обзор литературы .1 История изобретения и принцип ПЦР

- Преимущества ПЦР и возможные ошибки при реализации методики

- Особенности ПЦР в реальном времени

- Практическое использование ПЦР

- Применение ПЦ в ветеринарии Выводы

- Литература

Заключение

. С момента изобретения ПЦР в 1983 году, метод ПЦР приобрёл большую популярность и способствовал развитию диагностических технологий.

. Критическими моментами в постановке молекулярно-генетических методов являются правильный забор биологического материала, правильный подбор условий проведения ПЦР, наличие навыков интерпретации полученных результатов.

. С помощью молекулярно-генетических методов возможно выявление многих практически значимых патогенов, изучение генетических свойств родственных организмов для их различения и т.д.

полимеразная цепная реакция

Список литературы

1. Аристова, В.А. Тест-система для выявления РНК вируса Крымской-Конго Геморрагической лихорадки методом ОТ-ПЦР / В.А. Аристова, Колобухина, М.Ю. Щелканов, Д.К. Львов // Вопросы вирусологии. - 2001. - № 4. - С. 7-15.

. Корнева, И.Н. Диагностика туберкулеза крупного рогатого скота с применением полимеразной цепной реакции. Сборник тезисов четвёртой Всероссийской научно-практической конференции "Генодиагностика инфекционных заболеваний" / Корнева И.Н., Осипова Е.П., Найманов А.Х. // М. 2002. С. 343-344.

. Малкова, Е.М. Изучение роли вируса краснухи в формировании врождённых пороков развития методом РТ-ПЦР / Е.М. Малкова, И.П. Терещенко, О.Н. Гришаева, Г.И. Тюников, И.Я. Извекова, И.Д. петрова, В.С. Петров, М.П. Гришаев, Е.И. Краснова // Педиатрия. - 2002.- №1.- с. 36-40.

. Мухина, А.А. Диагностика ротавирусной инфекции методом полимеразной цепной реакции / А.А. Мухина // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2002.- №2. - с. 43-47.

. Петрова, И.Д. Выявление врождённых пороков развития / И.Д. Петрова // Аллергия, астма и клиническая иммунология. - 2000.- №10. - с. 20-23.

. Резник, В.И. Особенности эпидситуации энтеровирусных инфекций на Востоке России в 2003-2004гг. / В.И. Резник, М.А. Перескокова, В.А. Шмелева // Дальневосточный журнал инф. патологии. -2005. - №7. - С. 25-32.

. Самсонова, А.П. Геномный полиморфизм патогенных лептоспир и проблемы ПЦР-диагностики лептоспирозов / А.П. Самсонова, Е.М. Петров, В.В. Лебедев // Клиническая лабораторная диагностика. - 2004. - № 9. - С. 30.

. Сборник санитарных и ветеринарных правил. 10. Туберкулез. СП 3.1.093-96, ВП 13.3.1325-96-1996. С. 157-172.

. Черноусова, Л.Н. Роль ПЦР-анализа в комплексных бактериологических исследованиях во фтизиатрии / Л.Н. Черноусова, Е.Е. Ларионова, Э.В. Севастьянова // Проблемы туберкулеза. 2001. № 3. С. 58-60.